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PCR實驗室布局

試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴增試劑的制備、包裝和貯存

樣品處理區(qū)：樣品注冊、子包；核酸提取、保存和加載

擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、注冊和報告

預(yù)擴增區(qū)和后擴增區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，并且必須使用不同的房間，*好在兩個區(qū)域之間有一定的間隔。

使用商業(yè)試劑盒在樣品處理區(qū)域中制備小試劑

樣品處理區(qū)域和試劑制備區(qū)域可以位于同一房間，只要滿足以下操作和清潔要求：

在生物安全柜中操作；

每個實驗者、實驗組使用各自的試劑和消耗品；

將含有污染物的容器密封并使用一次；

實驗前后對操作區(qū)域和共用設(shè)備進(jìn)行有效清潔和消毒。

PCR實驗室建設(shè)規(guī)劃要點

1、主要結(jié)構(gòu)：

主體是彩鋼板、鋁合金型材。房間的所有內(nèi)角、正角均由鋁合金50圓形鋁制成，這解決了容易污染的問題、灰塵、難以清潔等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡潔，外形美觀，密封性好。

2、標(biāo)準(zhǔn)三區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié)：

PCR過程分為試劑制劑。在三個獨立的實驗區(qū)中進(jìn)行、樣品制備和PCR擴增測定。整個地區(qū)都有一個整體緩沖走廊。每個獨立的實驗區(qū)都設(shè)有一個緩沖區(qū)，每個區(qū)域都受氣壓調(diào)節(jié)，從而在整個PCR實驗過程中保護試劑和標(biāo)本免受氣溶膠污染，減少了對人和環(huán)境的擴增產(chǎn)物的污染。

緩沖器I可以打開，緩沖器II的排氣扇和PCR放大區(qū)域在外面排出，可調(diào)節(jié)風(fēng)量的出風(fēng)口安裝在實驗區(qū)和每扇門的外壁上，空氣通風(fēng)在室內(nèi)通過回風(fēng)口。。

3、消毒：

紫外燈安裝在三個實驗區(qū)域和三個緩沖區(qū)的頂部，并在傳輸窗口內(nèi)進(jìn)行消毒。

在試劑制備區(qū)域和樣品制備區(qū)域中還提供移動的紫外燈，以對實驗臺進(jìn)行部分消毒。

4、機械鏈不銹鋼傳遞窗：

試劑和樣品通過機械互鎖不銹鋼（不建議用于電子聯(lián)鎖）進(jìn)行交付，以確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過程中不被污染（個人分流）

5、地

建議使用PVC盤繞地板或自流動地板以獲得良好的地面。易于清潔和耐腐蝕。水磨石地板也可以無條件地使用，或者大塊瓷磚（至少800 mm x 800 mm）接縫需要小于2 mm。

6、照明

燈具應(yīng)清潔光滑，可達(dá)到易于清潔的特點、無塵。

注意施工過程

●標(biāo)準(zhǔn)化的安裝流程和全面的服務(wù)流程

●嚴(yán)格遵循科學(xué)設(shè)計的安裝流程。

●安裝前，需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源線位置，電話網(wǎng)線入口位置，進(jìn)水壓力，*小安裝空間，地面，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管位置等。理想的空間大小和通風(fēng)口的大小。

PCR實驗室設(shè)計要點

PCR實驗室可以是分散形式或組合形式。完成一組PCR實驗，通常通過試劑制備、樣品處理、核酸擴增和產(chǎn)物分析四個實驗步驟，如果實驗過程需要，還應(yīng)增加樣品破碎過程。

一個、分散形成PCR實驗室

所謂的分布式PCR實驗室是指完成上述實驗過程的實驗室彼此相距很遠(yuǎn)并且處于分布式排列。對于這種類型的PCR實驗室，不需要特殊條件，因為實驗不容易相互干擾。

兩個、組合形成PCR實驗室

所謂組合形式PCR實驗室是指完成PCR的四個實驗過程的實驗室彼此相鄰排列以形成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合式PCR實驗室，由于每個實驗的集中安排，容易引起相互干擾，因此對整體布局和屏障系統(tǒng)有一定的要求。每個艙室在入口處設(shè)有緩沖室，以減少室內(nèi)和室外空氣交換。

PCR實驗室不可忽視的幾點設(shè)計

1、實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計和壓力控制

PCR實驗室沒有嚴(yán)格的純化要求，但為了避免各個實驗區(qū)域之間存在交叉污染的可能性，建議使用全流量全流量氣流組織。同時，要嚴(yán)格控制排氣的比例為、，以保證每個實驗區(qū)的壓力要求。

2、預(yù)防和控制污染

PCR實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染。在實踐中，以下類型的污染是常見的：擴增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑污染和試樣之間的污染。由于污染發(fā)生，必須停止實驗直到找到污染源，并且必須丟棄實驗結(jié)果并且需要重復(fù)實驗。因此，在污染發(fā)生后，在實驗室周圍浪費尋找污染源不僅浪費時間和麻煩，而且浪費人力和資源。因此，為避免污染，應(yīng)首先進(jìn)行預(yù)防，而不是排除。

3、PCR實驗室必不可少的嚴(yán)格管理

（1）嚴(yán)格控制進(jìn)出實驗室的人員。與實驗無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)入或離開實驗室，必要時設(shè)置進(jìn)出整個實驗區(qū)的獨立通道和門；

（2）盡量減少實驗區(qū)域內(nèi)不必要的移動，以減少交叉污染的可能性

（3）擴增產(chǎn)物分析區(qū)是擴增產(chǎn)物污染的*重要來源。廢液不能傾倒在實驗室中。必須將其浸入消毒劑溶液中并丟棄在遠(yuǎn)離實驗室的地方。使用過的尖端是一次性的。材料也應(yīng)在消毒液中浸泡和消毒處理，如焚燒；

（4）擴增產(chǎn)物分析區(qū)可能存在一些基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實驗人員的安全防護。

3.完整的實驗室配套設(shè)施

完整的實驗室配套設(shè)施是確保實驗工作的必要條件。設(shè)備和儀器應(yīng)根據(jù)每個實驗室的實驗內(nèi)容配備，如超潔凈工作臺、離心機、取樣器等。